一、目的
1．学习动物基本操作技能—小鼠的捉拿、固定及不同给药途径的给药方法。
2．掌握药效学研究试验设计基本原则，学习动物随机分组方法。
3．学习抗精神分裂症、抗惊厥药物作用研究方法。
二、与试验相关的理论知识要点
（一）动物基本操作技能
小鼠的捉拿、固定及不同给药途径的给药方法见第一篇第三章。
（二）药效学研究试验设计基本原则
见第一篇第四章、第三篇第八章。
三、教学试验安排及内容
（一）教学分组
在一个教学单元内，根据学生人数，将学生分为8组，每组2～5人,分为上下两班，4组/班。
（二）试验方案
受试样品：2个，自备，上半班采用A物质试验，下半班采用B物质试验。建议样品：A-洋金花水提取物；B-洋金花醇提取物。
四、试验方法及步骤
（一）试验材料
1．动物：小白鼠18～22g，雄性，非同笼喂养。
2．试剂、药品：0.08%氯丙嗪，5%可拉明，1%苯巴比妥钠，生理盐水。
3．受试物：A药、B药。建议受试药A-洋金花水提取物；B-洋金花醇提取物。
4．试验器材：YLS-9A生理药理电子刺激仪或YSD-4G生理药理实验多用仪及附件激怒盒，万用电表，小动物电子秤，鼠笼，1ml注射器，5号针头
（二）试验方法
1．电刺激小白鼠激怒试验
（1）原理：以弱电流或低电压刺激鼠足部，引起鼠间对峙、格斗和互咬等激怒反应，以此为指标观察受试物的对狂躁动物的镇静作用。以氯丙嗪为阳性对照药、生理盐水为阴性对照药。
动物筛选：取异笼喂养的小鼠各一只，称重后，放入附件激怒盒的导电铜丝板上，把盖子盖上后，将电源打开，调节交流电输出旋钮，直至小鼠出现激怒反应，刺激电压一般为30V左右。激怒反应表现为：两鼠对立、前肢离地、对峙、互相嘶咬等，若刺激1min以上仍未出现者弃之不用。以上方法挑选有激怒反应的合格小鼠四对，编号。并记录刺激电压值。
（2）给药：第一对小鼠腹腔注射（ip）生理盐水、第二对小鼠ip 0.08%氯丙嗪、第三对小鼠ip
4mg/ml(按原生药含量)A药或B药高浓度、第四对小鼠ip
2mg/ml(按原生药含量)A药或B药低浓度，给药体积均为0.1ml/10g。给药20min后，先用万用电表调节刺激输出电压至给药前引起激怒反应的阈电压，然后断开电源，将一对小鼠置于导电铜丝板上，再打开电源，刺激1min观察两对小鼠给药前后反应的差异。
2．抗惊厥试验
可拉明为中枢兴奋药，过量可引起惊厥。本试验以可拉明为惊厥模型，观察受试药物的抗惊厥作用。以戊巴比妥为阳性对照药、生理盐水为阴性对照药。
试验分为：生理盐水组、阳性对照组，ip 1%苯巴比妥溶液、受试物高剂量组，ip
4mg/ml(按原生药含量)A或B溶液、受试物低剂量组，ip 2mg/ml(按原生药含量)
A或B溶液，给药体积均为0.1ml/10g。给药20min后皮下注射5%可拉明（0.1ml/10g体重），观察并记录小鼠反应和死亡情况。
（三）试验结果的原始记录
表1 受试物对生理药理电子刺激仪（生理药理实验多用仪）刺激小白鼠激怒作用的影响
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编号 |
体重 |
组别 |
剂量 |
激怒反应 |
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1（♂） |
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生理盐水
阴性对照组 |
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2（♂） |
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3（♂） |
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氯丙嗪
阳性对照组 |
0.08g/kg |
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4（♂） |
|
|
5（♂） |
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受试物A或B
高剂量组 |
2g/kg |
|
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6（♂） |
|
|
7（♂） |
|
受试物A或B
低剂量组 |
0.4g/kg |
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|
8（♂） |
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表2 受试物对可拉明致小鼠惊厥作用的影响
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编号 |
体重 |
组别 |
剂量 |
小鼠反应和死亡情况 |
|
9（♂） |
|
生理盐水
阴性对照组 |
|
|
|
10（♂） |
|
苯巴比妥
阳性对照组 |
0.1g/kg |
|
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11（♂） |
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受试物A或B
高剂量组 |
2g/kg |
|
|
12（♂） |
|
受试物A或B
低剂量组 |
0.4g/kg |
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（四）结果处理
按上下班统计数据，计算阳性率或死亡率，并进行显著性差异比较。数据用表格表示，示范表格如下：
表3 受试物对生理药理电子刺激仪（生理药理实验多用仪）刺激小鼠激怒作用的影响
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组别 |
体重 |
剂量 |
激怒对数 |
阳性率（%） |
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生理盐水
阴性对照组 |
|
|
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|
苯巴比妥
阳性对照组 |
|
0.1g/kg |
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|
受试物A或B高剂量组 |
|
2g（生药）/kg |
|
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受试物A或B
低剂量组 |
|
0.4g（生药）/kg |
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表4 受试物对可拉明致小鼠惊厥作用的影响
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组别 |
体重 |
剂量 |
死亡数 |
死亡率（%） |
|
生理盐水
阴性对照组 |
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|
苯巴比妥
阳性对照组 |
|
0.1g/kg |
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受试物A或B
高剂量组 |
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2g（生药）/kg |
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受试物A或B
低剂量组 |
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0.4g（生药）/kg |
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五、试验报告内容及格式要求
同前，试验题目由学生自定。
注意事项：
1．刺激电压必须由小到大，过低不能引起激怒，过高会引起小鼠逃避，且每次使用生理药理电子刺激
仪（生理药理实验多用仪）刺激完后，应将刺激电压调至最小，并将小鼠放回鼠笼，以免在铜丝板上排便影响导电。
2．小白鼠惊厥前兆为竖尾、洗脸等反应。
3．腹腔注射在小白鼠下腹部，切勿进针过深损伤内脏，否则内脏出血小白鼠而死，影响试验进行。
4．小鼠惊厥时要注意不要被鼠咬到。
（刘敏）
文章来源：http://kczx.whu.edu.cn/Able.acc2.web/Template/office/cd86f1611f334fbbb14de54811-2126808102549.html
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